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程：    

金黃色葡萄球菌的測試片檢驗方法

方法編號：5042 

1 適用范圍：可用于各類(lèi)食品和原料中金黃色葡萄球菌的檢測以及突發(fā)事件應急需要。

2 方法原理：將選擇性培養基中加入專(zhuān)一性的酶顯色劑，并將其加載在紙片上，通過(guò)培養，如果樣品中含有黃色葡萄球菌，即可在紙片上呈現紫紅色的菌落。

3 操作方法

3．1 樣品處理：無(wú)菌操作取25g（25mL）樣品放入含有225mL無(wú)菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯內，充分振搖或置均質(zhì)器中制成樣品勻液，靜置片刻。

3．2接種：將測試片置于平坦實(shí)驗臺面，揭開(kāi)上層膜，用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置5 min使培養基凝固，zui后用手輕輕地壓一下。每個(gè)樣品接種兩片。

3．3培養：將加了樣的測試片疊放在一起，放入原來(lái)的自封袋中，堆疊片數不超過(guò)12片，透明膜向上平放在37℃培養箱內培養15h～24h。

3．4 結果觀(guān)察：對測試片進(jìn)行觀(guān)察，紫紅色菌落為金黃色葡萄球菌，大腸埃希氏菌，普通大腸桿菌呈藍色菌落，而溶血性鏈球菌，沙門(mén)氏菌，變形桿菌在試片上不生長(cháng)。

4 附加說(shuō)明

4．1山東省疾病預防控制中心的驗證結果表明，當金黃色葡萄球菌在0～9個(gè)菌落范圍內時(shí)，測試片與血平板均能檢出，作為致病菌不得撿出的標準要求，可以作為金黃色葡萄球菌檢驗應用。

4．2 本法還可應用于從業(yè)人員體檢、中毒樣品和物體表面的檢測，用取樣棉簽涂抹被測物體表面，放入裝有3mL滅菌生理鹽水的試管中，搖晃10s，然后取1mL接種到測試片上。

4．3試驗后紙片應及時(shí)按生物安全要求進(jìn)行無(wú)害化處理。

4．4出現陽(yáng)性菌落的樣本，用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗證，沒(méi)有條件的話(huà)至少再取樣重復檢驗一次。