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程：    

金黃色葡萄球菌的測(cè)試片檢驗(yàn)方法

方法編號(hào)：5042 

1 適用范圍：可用于各類食品和原料中金黃色葡萄球菌的檢測(cè)以及突發(fā)事件應(yīng)急需要。

2 方法原理：將選擇性培養(yǎng)基中加入專一性的酶顯色劑，并將其加載在紙片上，通過(guò)培養(yǎng)，如果樣品中含有黃色葡萄球菌，即可在紙片上呈現(xiàn)紫紅色的菌落。

3 操作方法

3．1 樣品處理：無(wú)菌操作取25g（25mL）樣品放入含有225mL無(wú)菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯內(nèi)，充分振搖或置均質(zhì)器中制成樣品勻液，靜置片刻。

3．2接種：將測(cè)試片置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，揭開上層膜，用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置5 min使培養(yǎng)基凝固，zui后用手輕輕地壓一下。每個(gè)樣品接種兩片。

3．3培養(yǎng)：將加了樣的測(cè)試片疊放在一起，放入原來(lái)的自封袋中，堆疊片數(shù)不超過(guò)12片，透明膜向上平放在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)15h～24h。

3．4 結(jié)果觀察：對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察，紫紅色菌落為金黃色葡萄球菌，大腸埃希氏菌，普通大腸桿菌呈藍(lán)色菌落，而溶血性鏈球菌，沙門氏菌，變形桿菌在試片上不生長(zhǎng)。

4 附加說(shuō)明

4．1山東省疾病預(yù)防控制中心的驗(yàn)證結(jié)果表明，當(dāng)金黃色葡萄球菌在0～9個(gè)菌落范圍內(nèi)時(shí)，測(cè)試片與血平板均能檢出，作為致病菌不得撿出的標(biāo)準(zhǔn)要求，可以作為金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)應(yīng)用。

4．2 本法還可應(yīng)用于從業(yè)人員體檢、中毒樣品和物體表面的檢測(cè)，用取樣棉簽涂抹被測(cè)物體表面，放入裝有3mL滅菌生理鹽水的試管中，搖晃10s，然后取1mL接種到測(cè)試片上。

4．3試驗(yàn)后紙片應(yīng)及時(shí)按生物安全要求進(jìn)行無(wú)害化處理。

4．4出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本，用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證，沒有條件的話至少再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。